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10%EDTA脫鈣液

聯(lián)系電話(huà):17748676726

產(chǎn)品詳情

規格:100mL | 500mL
保存:常溫保存,有效期 24 個(gè)月。


產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

一些組織內含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗,如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無(wú)機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。

EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類(lèi), 經(jīng) EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數周至數月。

EDTA 脫鈣液優(yōu)點(diǎn):①經(jīng) EDTA 脫鈣的組織染色結果好;②對組織的結構損害??;③用化學(xué)方法測試可以確定脫鈣的終點(diǎn)。
EDTA 脫鈣液缺點(diǎn):①脫鈣速度很慢,不適合常規標本脫鈣使用;②脫鈣后組織會(huì )稍微變硬。

操作步驟:
1,骨組織脫鈣時(shí),取材不易過(guò)厚,一般大約 5mm。
2,組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3,組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min。
4,組織轉移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長(cháng)時(shí)間。如果想加快脫鈣速度,可以置于 37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續脫鈣,多數組織脫鈣 2 周~3 個(gè)月即可,每周更換一次,直至終點(diǎn)。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,依據組織厚度和密度重復 3~5min,中間間隔 3~5min。
5,用蒸餾水沖洗數次。
6,常規脫水、包埋。

注意事項:
1,厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣 10~30 天即可。
2,適當加溫能加快脫鈣的速度,一般不應超過(guò) 37~40℃,溫度過(guò)高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于 60℃。
3,脫鈣應徹底,防止脫鈣不足或過(guò)度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間,以免脫鈣過(guò)長(cháng)引起組織損害。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5,骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行,不應先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6,每隔一段時(shí)間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過(guò)度,脫鈣過(guò)度會(huì )增加組織的損傷程度,影響染色結果。
7,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。


附錄:
脫鈣終點(diǎn)的測定(物理法):采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當骨組織變軟或針刺時(shí)沒(méi)有阻力感即可終止脫鈣。物理檢測法會(huì )對組織結構有一定的損害, 盡量避免用力過(guò)大或反復檢測。
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