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糖尿病模型（DM）是胰島素抵抗和胰島素缺乏導致的以高血糖為主要特征表現的代謝紊亂綜合征，易發(fā)生心、腦、腎等并發(fā)癥。糖尿病狀態(tài)下血漿游離脂肪酸異常增高，心肌耗能增加，葡萄糖代謝下降，脂肪酸代謝增加，心臟內過(guò)量的脂肪酸攝取和氧化導致心肌內脂肪代謝產(chǎn)物的積聚引起心臟脂質(zhì)毒性，并在此基袖上出現氧化應激，導致細胞調亡、內皮功能紊亂、炎癥反應增加，同時(shí)出現心肌的損傷，心肌的結構和功能均發(fā)生改變，最后導致糖尿病患者的死亡。

Ⅱ型小鼠造模及治療方案

動(dòng)物選取

SPF級Balb/C小鼠，雄性，周齡為4w~6w，體重為18g~20g。
經(jīng)驗：先適應性喂養一周，體內外環(huán)境適應，一周后體重體重水平20-24g.

高脂喂養
高脂喂養4-6周，體重達到32g以上。

高脂飼料

BJBAG1035DM (日糧型）,BJBAG12451M（純化型），同時(shí)設立空白組。

預試驗階段

1.預實(shí)驗分組：

造模梯度試驗分3組（例如：120mg/kg, 110mg/kg，100mg/kg)。

備注：預試劑量值選取，和批次體重水平相關(guān)。體重水平高，應調低單位給藥量水平，不同品系和重量水平的給藥推薦可以咨詢(xún)我公司技術(shù)客服。

2.治療份組：對照組（模型組）、陽(yáng)性藥組、受試藥組（三個(gè)濃度）。

3.組只要求：建議每組10-15只動(dòng)物。
  備注：統計學(xué)要求，組只10只以上，具備統計學(xué)意義。

4. 實(shí)驗周期：適應性喂養1w+模型判定2w+治療（4-12w)+取材

STZ注射及緩沖液配置

5. 檸檬酸鈉緩沖液配制：將2.10 g檸檬酸加入雙蒸水100 ml配成檸檬酸母液， 稱(chēng)為A液； 將2.94g檸檬酸三鈉加入雙蒸水100 ml配成檸檬酸鈉母液，稱(chēng)為B液； 將A、B液按1:1比例（或1：1.32）混合，pH計測定pH值，調定溶液pH=4-4.4之間，即是所需配制STZ的0.1 mol/L檸檬酸鈉緩沖液。

6. STZ溶液的配制：按1%稀釋STZ, 即10mgSTZ:1mlSTZ，并用0.22μm濾菌器過(guò)濾除菌?，F用現配。

正式造模

7.空腹12h,建議隔夜禁食；

8. 模型組小鼠按照預實(shí)驗摸索的劑量注射STZ， 腹腔注射或靜脈注射。

9. STZ注射3d后，測空腹血糖，選擇血糖高于16. 7 mmol/L納入正式實(shí)驗。

10. 治療（藥物干預）階段，設立對照組，對照組應同步注射藥物稀釋液，每周測血糖、體重，觀(guān)察體重血糖變化。

取材階段

11.治療結束后，根據測量值的需求，選取對應的固定方法進(jìn)行取材。取黃脂，皮下脂肪，骨骼肌，白脂，肝臟，肺臟，心臟，腎臟用于病理和分子生物學(xué)檢測，摘眼球采血，室溫靜置2h后于4℃ 3000r離心10分鐘提取血清，放入-80冰箱凍存。

模型評價(jià)

1. 大體觀(guān)察：正常組小鼠體型適中，精神狀態(tài)良好，動(dòng)作自如，反應靈敏，毛發(fā)平伏有光澤。而糖尿病小鼠體重變輕，精神萎靡，反應遲鈍，毛豎無(wú)光澤，動(dòng)作遲緩，弓背捲體，尿量顯著(zhù)增加。糖尿病小鼠較正常組體重顯著(zhù)減輕，心臟系數、肝臟系數較正常組有顯著(zhù)增加，且有統計學(xué)意義。

2. 空腹血糖、甘油三酯和總膽固醇水平的變化：

正常對照組的空腹血糖、甘油三酯和總膽固醇水平在實(shí)驗前后均無(wú)顯著(zhù)差異；

模型組的空腹血糖、甘油三酯和總膽固醇水平顯著(zhù)高于對照組，

3. 糖尿病小鼠心臟組織形態(tài)學(xué)的變化

經(jīng)HE染色可見(jiàn)正常對照組小鼠心肌纖維排列整齊，致密，結構清晰，細胞核染色質(zhì)分布均勻，細胞外間質(zhì)較少，微血管結構正常，可見(jiàn)少量成纖維細胞，間質(zhì)無(wú)明顯的炎癥細胞浸潤；糖尿病模型組小鼠心肌纖維排列紊亂，心肌細胞肥大，細胞間隙增大，結構不清晰，有的細胞核膜皺縮，核固縮，并有炎癥細胞浸潤，肌細胞間也可見(jiàn)成纖維細胞浸潤

4. 糖尿病小鼠肺臟組織形態(tài)學(xué)的變化

HE染色顯示，對照組小鼠肺組織結構清晰，肺泡分布均勾，肺泡隔、支氣管

壁完整，肺間質(zhì)分布均勻，少見(jiàn)炎性細胞浸潤；DM組小鼠肺組織結構紊亂，部分肺泡腔萎縮、塌陷，可見(jiàn)肺大泡，支氣管壁增厚，肺間質(zhì)和血管周?chē)毎饣|(zhì)增多，成纖維細胞增多，并有大量炎癥細胞浸潤，

5. 糖尿病小鼠腎臟組織形態(tài)學(xué)的變化

HE染色顯示，DM組小鼠腎小球肥大增生，腎小球系膜基膜增厚，腎小管空泡變性，胞質(zhì)空亮。

6. 糖尿病小鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)的變化

經(jīng)油紅O染色可見(jiàn)糖尿病小鼠肝內脂滴較大，紅色脂滴明顯，肝臟可見(jiàn)顯著(zhù)的脂質(zhì)沉積。